體外細(xì)胞原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)實驗步驟（1）凍存和復(fù)蘇

一、實驗原理細(xì)胞培養(yǎng)可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。直接從體內(nèi)獲取的組織細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)為原代培養(yǎng)；當(dāng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞增殖達(dá)到一定密度后，則需要做再培養(yǎng)，即將培養(yǎng)的細(xì)胞分散后，從一個容器以1：2或其他比率轉(zhuǎn)移到另一個或幾個容器中擴(kuò)大培養(yǎng)，為傳代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)的累積次數(shù)就是細(xì)胞的代數(shù)。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或DMSO作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的...

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小鼠子宮頸癌細(xì)胞胞培養(yǎng)步驟說明

小鼠子宮頸癌細(xì)胞胞培養(yǎng)步驟培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM,GIBCO,貨號11965-092),90%;胎牛血清,10%2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37C,培并箱濕度為709%-80%。凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存有1mlL細(xì)抱縣液的凍存管迅速放入37C水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖売解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,...

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如何操作可避免血清中產(chǎn)生沉淀！

按以下操作可避免血清沉淀的產(chǎn)生：1、解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。2、血清分裝凍存時，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。3、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。4、勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。5、勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。6、若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃...

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大鼠原代細(xì)胞分離與培養(yǎng)

一、大鼠神經(jīng)元細(xì)胞（酶消化法）簡述：新生24h或E18胎鼠，取腦，剝離海馬，剪碎，木瓜酶消化，清洗過篩后鋪于多聚賴氨酸包被的培養(yǎng)板中。二、大鼠雪旺細(xì)胞（植塊法）簡述：新生24h大鼠，取坐骨神經(jīng)，剝?nèi)ネ饽ず褪?，剪?mm3的小塊，均勻鋪于培養(yǎng)皿內(nèi)，加少量血清，37℃CO2培養(yǎng)2h后，再加入培養(yǎng)基，24-48h后有細(xì)胞爬出。三、大鼠胰島（酶消化加密度梯度離心）簡述：SD大鼠，常規(guī)麻醉、固定、消毒、進(jìn)腹、膽總管插管，逆行注入預(yù)冷的１mg/ml膠原酶P溶液10ml。迅速取下胰腺，3...

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智能細(xì)胞成像系統(tǒng)

智能細(xì)胞成像系統(tǒng)創(chuàng)新的采用全觸屏控制，可以*替代復(fù)雜的顯微操作，讓實驗室工作從此變得輕松有趣。同時科研級成像系統(tǒng)保證了一liu的成像效果，全外殼防水的一體化設(shè)計實現(xiàn)了細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)置，在做普通顯微觀察時可以令整個操作過程變得簡單而流暢。用途：內(nèi)置于CO2培養(yǎng)箱，進(jìn)行細(xì)胞成像應(yīng)用。工作條件;(1)環(huán)境溫度：0-40℃(2)相對濕度：0-100%RH(3)工作電壓：100-250V強大的配置和功能:(1)配置了內(nèi)置電池模塊，也可通過電源插口外接電源。(2)內(nèi)置8G數(shù)據(jù)儲存空間，可通...

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